Tôm giống -Ảnh minh họa
Tác giả đã nghiên cứu mẫu tôm càng xanh giống được thu từ tháng 1/2011 đến tháng 6/2011 ở 7 trại sản xuất tôm càng xanh giống thuộc Cần Thơ và Đồng Tháp. Trước khi tiến hành thu mẫu, những thông tin về trại giống như nguồn gốc tôm bố mẹ, cách chăm sóc, quản lý bể ương, nguồn nước cấp, giai đoạn tôm giống, … được ghi nhận. Mỗi bể ương thu khoảng 100 con, chứa trong bao nylon có bơm khí oxy, vận chuyển tôm sống về phòng thí nghiệm. Nhuộm mẫu với malachite green (50 con) và quan sát dưới kính hiển vi. Khi phát hiện MBV, số tôm còn lại sẽ được cố định trong dung dịch Davison’s để phân tích mẫu mô bệnh học. Nghiên cứu được thực hiện bằng hai phương pháp. Phương pháp thứ nhất là nhuộm nhanh Malachite green, dùng pen và kim mũi giáo nhẹ nhàng tách phần gan tụy của 1 cá thể tôm đặt trên lame. Nhỏ 1 giọt dung dịch 0,1% Malachite Green lên mẫu, đậy lamella lại. Dùng kim mũi giáo tán nhuyễn phần gan tụy sao cho các tế bào gan tụy thấm đều malachite green. Quan sát các thể ẩn dưới kính hiển vi trong vòng 5 phút. Các thể ẩn MBV bắt màu xanh, hình cầu đơn lẻ hay kết thành từng chum. Phương pháp thứ hai là mô bệnh học. Mẫu tôm càng xanh giống được cố định trong dung dịch Davison’s được xử lý, đúc khối, cắt lát và nhuộm với Hematoxyline và Eosin theo quy trình phân tích mô học của Lightner. Sau khi có tiêu bản hoàn chỉnh, tiến hành đọc kết quả, tiêu bản được quan sát dưới kính hiển vi lần lượt ở các độ phóng đại 10X, 40X và 100X. Tiêu bản đẹp phải có nhân bắt màu xanh tím của Haematoxylin, phần còn lại bắt màu hồng của Eosin. Các cơ quan tôm càng xanh giống được quan sát bao gồm gan, tụy, lớp tế bào biểu bì ruột, mang, cơ và dây thần kinh.
Kết quả nghiên cứu cho thấy, qua khảo sát 11 mẫu tôm càng xanh bằng phương pháp nhuộm nhanh Malachite green cho thấy có 3 mẫu nhiễm MBV biểu hiện thể ẩn và bắt màu xanh của thuốc nhuộm malachite green. Cả 3 mẫu dương tính đều được thu từ trại giống ở Đồng Tháp trong khi các mẫu thu từ trại giống ở Cần Thơ đều âm tính. Kết quả mô bệnh học cho phép nhận biết được MBV nhiễm trên tôm càng xanh giống với các biểu hiện cấu trúc tế bào thay đổi giống như ảnh hưởng trên tôm sú, tế bào nhiễm có nhân trương to, nhiễm sắc thể di chuyển ra sát màng tế bào ở giai đoạn sớm, giai đoạn tiếp theo có sự xuất hiện thể ẩn bắt màu hồng của Eosin. |