Nghiên cứu
[ Đăng ngày (19/12/2013) ]
|
|
Nghiên cứu tạo chủng vi khuẩn Salmonella choleraesuis nhược độc mang plasmit tái tổ hợp đã được dòng hóa hai kháng nguyên của E.coli
|
|
|
Nghiên cứu do các tác giả Vũ Khắc Hùng, Đào Hoài Thu, Đỗ Văn Tấn, Nguyễn Thị Thu Thủy, Nguyễn Xuân Trường, Hoàng Huy Hòa và Nguyễn Thị Kim Phụng nhằm mục tiêu tạo được chủng vi khuẩn Salmonella choleraesuis nhược độc mang hai kháng nguyên ngoại lai, kháng nguyên độc tố shiga Stx2e và kháng nguyên bám dính F18ab (với tiểu phân tử FedF) của vi khuẩn Escherichia coli.
|
Bệnh phù đầu và phó thương hàn lợn do vi khuẩn E. Coli và S. Choleraesuis là hai bệnh xuất hiện vói tần số cao và gây thiệt hại rất lớn về kinh tế ở hầu hết các loại hình chăn nuôi. Trong nghiên cứu này, nhóm nghiên cứu đã tiến hành lai ghép để tạo plasmit tái tổ hợp pYA3493/stx2e/FedF và biến nạp vào vi khuẩn s. choleraesuis. Trước tiên, các đoạn gien Stx2e (204 bp) và FedF (840 bp) được khuếch đại từ vi khuẩn E. coỉi BD 348 bằng phương pháp PCR và lai ghép vói plasmit pUC19 để tạo plasmit tái tổ họp pUC19/stx2e/FedF. Tiếp theo, đoạn gien stx2e/FedF đã được phân cắt từ plasmit pUC19/stx2e/FedF và được dòng hóa vào plasmit pYA3493 để tạo plasmit tái tổ họp pYA3493/stx2e/FedF. Kết quả dòng hóa được kiểm tra bằng phản ứng PCR, phản ứng phân cắt enzym giói hạn và giải trình tự gien. Cuối cùng, plasmit tái tổ họp pYA3493/stx2e/FedF được biến nạp vào vi khuẩn s. choleraesuis mang 2 gien asd và crp bị đột biến bằng phương pháp xung điện.
Kết quả kiểm tra bằng phương pháp SDS-PAGE và Westem blot cho thấy, vi khuẩn nhược độc S. Choleraesuis mang hai kháng nguyên ngoại lai đã tổng hợp thành công protein stx2e-FedF có trọng lượng phân tử 37 KDa là kháng nguyên của vi khuẩn E. coli. Plasmit tái tổ họp mang kháng nguyên ngoại lai của vi khuẩn E. coli ổn định trong tế bào vi khuẩn s. choleraesuis qua 60 lần cấy chuyển. Kết quả nghiên cứu là cơ sở để tạo chủng vắc-xin phòng trị bệnh phù đầu và phó thương hàn lợn. |
ttncac
Theo Tạp chí Nông nghiệp & PTNN, số 22/2013 |