Ảnh minh họa

Tác giả đã nghiên cứu tôm càng xanh có trọng lượng từ 15-25g được chọn từ trại nuôi tôm ở Cần Thơ được chuyển về thuần dưỡng trong bể nước ngọt (thể tích 1m³) tại phòng thí nghiệm ướt, Khoa Thủy sản, Trường Đại học Cần Thơ. Nhiệt độ nước trong bể được duy trì trong khoảng 28-32°. Tôm được cho ăn mỗi ngày 2 lần bằng thức ăn viên. Trước khi nghiên cứu, 3 mẫu tôm được thu ngẫu nhiên, kiểm tra tôm không bị nhiễm các mầm bệnh ký sinh trùng, vi khuẩn và virus. Nguồn tôm sú bệnh đốm trắng (trữ ở -80^oC) của Khoa thủy sản, Trường Đại học Cần Thơ sử dụng để tiêm dịch chiết WSSV. Cách bố trí thí nghiệm để xác định các chỉ tiêu miễn dịch tự nhiên của tôm theo phương pháp của Reed và Muench. Dịch chiết WSSV pha loãng 2 lần với dung dịch đệm 1X PBS thành 8 nồng độ khác nhau để tìm giá trị LD50. Tôm được bố trí vào 8 bể  (mật độ 6 con/bể 80L) tương ứng với 8 độ pha loãng và một bể đối chứng. Mỗi con tôm được tiêm 50µl dịch chiết virus đã pha loãng vào cơ ở đốt bụng thứ hai của tôm, bể đối chứng được tiêm dung dịch đệm 1X PBS. Chỉ số I  được áp dụng cho nồng độ có tỷ lệ gây nhiễm/chết trên 50%, từ đó tìm ra độ pha loãng mà tại đó lượng virus trong dung dịch có thể đủ để gây nhiễm/chết 50% tôm được cảm nhiễm. Xác định các chỉ tiêu miễn dịch, bố trí trong hệ thống bể nhựa 150 L, cấp nước vào 2/3 bể, sục khí liên tục. Nhiệt độ nước dao động từ 28-32°C. Tôm càng xanh được bố trí 20 con/ bể, với 3 nghiệm thức 1, 2, 3 tương ứng với 3 liều lượng là LD50, LD50.10-2, LD50.10-4 và 1 nghiệm thức đối chứng tiêm PBS 1X. Mỗi nghiệm thức được bố trí lặp lại 3 lần. Tôm sau khi bố trí vào bể tiếp tục thuần dưỡng 2 ngày. Sau đó thu ngẫu nhiên 2 con/bể để lấy máu phân tích các chỉ tiêu miễn dịch. Tôm còn lại trong bể tiêm 50 µl dịch chiết WSSV/tôm (PBS 1X đối với nghiệm thức đối chứng) vào đốt bụng thứ 2. Sau khi gây cảm nhiễm 1, 3, 5, 10, 15 ngày thu mỗi bể 2 con tôm để lấy máu xác định các chỉ tiêu miễn dịch bằng các phương pháp chuẩn bị virus gây cảm nhiễm; xác định tổng số bạch cầu và định loại bạch cầu; hoạt tính của Phenoloxidase (PO); hoạt tính Respiratory burst; hoạt tính của superoxide dismutase.

Kết quả nghiên cứu cho thấy, ở tôm càng xanh cảm nhiễm WSSV không có sự khác biệt về tổng tế bào máu so với tôm không cảm nhiễm và giữa các nhóm tôm cảm nhiễm WSSV với mức độ khác nhau. Tuy nhiên, tỷ lệ các loại bệnh, hoạt tính của phenoloxidase, respiratory burst, superoxide dismutase cũng có những sự thay đổi nhất định có ý nghĩa. Như vậy, tôm càng xanh có biểu hiện đáp ứng miễn dịch tự nhiên khi nhiễm WSSV.