Nông - Lâm - Ngư nghiệp [ Đăng ngày (27/10/2012) ]
Phân lập và xác định khả năng gây bệnh xuất huyết trên cá rô đồng (Anabas Testudineus) của vi khuẩn Streptococcus Agalactiae
Nghiên cứu do các tác giả Đặng Thị Hoàng Oanh, Trương Quỳnh Như - Bộ môn Sinh học và Bệnh Thủy sản, Khoa Thủy sản, Trường Đại học Cần Thơ và Nguyễn Đức Hiền - Chi cục Thú Y Cần Thơ thực hiện nhằm dựa vào các dấu hiệu bệnh lý và xét nghiệm để xác định tác nhân gây bệnh xuất huyết của vi khuẩn S. agalactiae týp 2 ở cá rô đồng và phòng trị hiệu quả bệnh vi khuẩn ở loại cá này.

Tác giả  đã nghiên cứu 12 mẫu cá rô đồng có dấu hiệu lờ đờ, xuất huyết được thu từ những ao nuôi cá rô đồng ở huyện Tháp Mười (Đồng Tháp) và được vận chuyển trong thùng mướp có sục khí về phòng thí nghiệm Khoa Thủy sản, Đại học Cần Thơ. Chỉ những mẫu bệnh phẩm còn sống mới được sử dụng để phân lập vi khuẩn. Trước khi phân lập vi khuẩn, mặt ngoài cơ thể cá được khử trùng bằng cồn 70o và lau sạch. Sau đó, tiến hành mổ cá bằng dao mổ và kéo tiệt trùng. Dấu hiệu bệnh lý bên trong cơ thể cá được ghi nhận. Kế đến, dùng dao mổ tiệt trùng rạch một đường trên thận và gan. Đặt que cấy vào nơi vừa rạch, xoay nhẹ để lấy mẫu bệnh phẩm và cấy trên đĩa môi trường Brain heart infusion agar (BHIA, Merck). Não cá cũng được phân lập vi khuẩn tương tự như gan và thận. Đĩa cấy được ủ 24 giờ ở 30°C. Các chủng vi khuẩn phân lập, sau khi tách ròng được trữ ở nhiệt độ -80°C trong môi trường Brain heart infusion broth (BHIB, Merck) có chứa 25% glycerol.  Định danh vi khuẩn bằng các chỉ tiêu hình thái, sinh lý và sinh hóa được chọn. Hình dạng, kích thước và tính ròng của vi khuẩn được xác định bằng phương pháp nhuộm Gram. Tính di động của vi khuẩn được quan sát bằng cách nhỏ một giọt nước cất lên lam, trãi đều lên lam một ít vi khuẩn, đậy bằng lammela và quan sát bằng kính hiển vi ở vật kính 40X. Các đặc điểm sinh lý và sinh hóa được xác  định dựa theo cẩm nang của Cowan và Steels và sử dụng kít API 20 Strep. Xác định kiểu huyết thanh của vi khuẩn bằng phương pháp ngưng kết miễn dịch, kit Strep-B-Latex (GBS) theo hướng dẫn của nhà sản xuất. Dung dịch latex được để ở nhiệt độ phòng và lắc đều trước khi sử dụng. Hai giọt dung dịch latex (khoảng 10 µl/giọt) được nhỏ lên hai lam. Dùng que cấy tiệt trùng lấy khoảng từ 3-5 khuẩn lạc cho vào 3ml nước muối sinh lý, lắc đều rồi nhỏ một giọt dung dịch vi khuẩn lên một lam. Một giọt nước muối sinh lý được nhỏ lên lam còn lại để làm đối chứng âm. Dùng tâm tiệt trùng trộn đều 2 dung dịch. Phản ứng dương tính sẽ xuất hiện trong 5 - 10 giây. Kết quả dương tính khi sử dụng Strep-B-Latex giúp xác định vi khuẩn Streptococus có kiểu huyết thanh Ib (serotype Ib) hay kiểu sinh học 2 (biotype 2). Gây cảm nhiễm, các bể được khử trùng bằng chlorine, rửa lại bằng nước sạch. Sau đó cho nước vào bể (25L), sục khí liên tục vài ngày để loại hết chlorine. Cá thí nghiệm có trọng lượng khoảng 20g/con, màu sắc tươi sáng, phản ứng linh hoạt. Cá được bố trí 10 con/bể và để vài ngày cho cá quen dần với môi trường nước thí nghiệm. Thí nghiệm được bố trí gồm 2 nghiệm thức lặp lại hai lần, gồm có nghiệm thức đối chứng, tiêm dung dịch 0.85% NaCl (0.1 ml/cá) và nghiệm thức cảm nhiễm tiêm chủng vi khuẩn Cá1Não1 (0.1 ml/cá),…

Kết quả nghiên cứu cho thấy, các chủng vi khuẩn phân lập từ các mẫu cá rô  đồng có dấu hiệu xuất huyết  là S. agalactiae  týp 2. Kết quả thí nghiệm cảm nhiễm xác định các chủng vi khuẩn này có khả năng gây xuất huyết cá rô đồng khỏe trong điều kiện cảm nhiễm thực nghiệm giống như dấu hiệu bệnh ở cá thu từ ao nuôi.

dtphong
Theo http://www.ctu.edu.vn
In bài viết  
Bookmark
Ý kiến của bạn

Video  
 
 



© Copyright 2020 Trung tâm Khởi nghiệp và Đổi mới sáng tạo - Sở Khoa học và Công nghệ TP. Cần Thơ
Địa chỉ: 118/3 Trần Phú - Phường Cái Khế - thành phố Cần Thơ
Giấy phép số: 05/ GP-TTĐT, do Sở Thông tin và Truyền Thông thành phố Cần Thơ cấp ngày 23/5/2017
Trưởng Ban biên tập: Ông Vũ Minh Hải - Giám đốc Trung tâm Khởi nghiệp và Đổi mới sáng tạo - Sở Khoa học & Công nghệ TP. Cần Thơ
Ghi rõ nguồn www.trithuckhoahoc.vn khi bạn sử dụng lại thông tin từ website này