Ảnh minh họa

Tác giả đã nghiên cứu hai mươi mẫu cá điêu hồng bệnh được thu từ các bè nuôi cá điêu hồng thâm canh ở huyện Cai Lậy, Tiền Giang. Mẫu được thu là những con cá lờ đờ, bơi lội mất phương hướng. Mẫu cá sau khi được vớt khỏi mặt nước thì tiến hành phân tích ngay và chỉ những mẫu bệnh phẩm còn sống mới  được sử dụng để phân lập vi khuẩn. Trước khi phân lập vi khuẩn, mặt ngoài cơ thể cá được khử trùng bằng cồn 70^oC và lau sạch. Sau đó, tiến hành mổ cá bằng dao mổ, kéo tiệt trùng. Dấu hiệu bệnh lý bên trong cơ thể cá được ghi nhận. Kế đến, dùng dao mổ tiệt trùng rạch một đường trên thận và gan. Đặt que cấy vào nơi vừa rạch, xoay nhẹ để lấy mẫu bệnh phẩm và cấy trên đĩa môi trường Brain heart infusion agar (BHIA, Merck). Não cá cũng được phân lập vi khuẩn. Đĩa cấy được ủ ở nhiệt độ khoảng 30-32°C trong 24 giờ. Các chủng vi khuẩn phân lập trữ  ở -80°C, có 25% glycerol. Với phương pháp định danh vi khuẩn, các chỉ tiêu hình thái, sinh lý và sinh hóa được chọn. Hình dạng, kích thước và tính ròng của vi khuẩn được xác định bằng phương pháp nhuộm Gram. Tính di động của vi khuẩn được quan sát bằng cách nhỏ một giọt nước cất lên lam, trải đều lên lam một ít vi khuẩn, đậy bằng lamen và quan sát bằng kính hiển vi ở vật kính 40X. Xác định kiểu huyết thanh bằng phương pháp ngưng kết miễn dịch sử dụng kit Strep-B-Latex (GBS) (Đan mạch). Hai giọt dung dịch latex (khoảng 10 µl/giọt) nhỏ lên hai lam. Dùng que cấy tiệt trùng lấy khoảng từ 3-5 khuẩn lạc cho vào 3ml nước muối sinh lý, lắc đều rồi nhỏ một giọt dung dịch vi khuẩn lên một lam. Một giọt nước muối sinh lý được nhỏ lên lam còn lại để làm đối chứng âm. Dùng tăm tiệt trùng trộn đều 2 dung dịch. Phản ứng dương tính sẽ xuất hiện trong 5 – 10 giây giúp xác định Streptococus có kiểu huyết thanh Ib (serotype Ib) hay kiểu sinh học 2 (biotype 2). Cuối cùng là xác định kiểu huyết thanh bằng phương pháp ngưng kết miễn dịch sử dụng kit Strep-B-Latex (GBS) (Đan mạch). Hai giọt dung dịch latex (khoảng 10 µl/giọt) được nhỏ lên hai lam. Dùng que cấy tiệt trùng lấy khoảng từ 3-5 khuẩn lạc cho vào 3ml nước muối sinh lý, lắc đều rồi nhỏ một giọt dung dịch vi khuẩn lên một lam. Một giọt nước muối sinh lý được nhỏ lên lam còn lại để làm đối chứng âm. Dùng tăm tiệt trùng trộn đều 2 dung dịch. Phản ứng dương tính sẽ  xuất hiện trong 5 – 10 giây giúp xác định Streptococus có kiểu huyết thanh Ib (serotype Ib) hay kiểu sinh học 2 (biotype 2).

Kết quả nghiên cứu cho thấy, các chủng vi khuẩn phân lập từ các mẫu cá điêu hồng có dấu hiệu xuất huyết và phù mắt là S. agalactiae týp 2. Kết quả thí nghiệm cảm nhiễm xác định các chủng vi khuẩn có khả năng gây bệnh trên cá khỏe trong điều kiện cảm nhiễm thực nghiệm giống như dấu hiệu bệnh ở cá thu từ bè nuôi. Giá trị LD50 của chủng vi khuẩn S. agalactiae  ĐH1não là  4,89x104 CFU/ml.